抗體檢測 - 觀察療效及預(yù)后的指標(biāo)
特異性抗體檢測的目的首先是協(xié)助臨床診斷,在某些疾病中亦是觀察療效及預(yù)后的一個(gè)指標(biāo),預(yù)防接種效果的觀察,以及傳染病流行病學(xué)調(diào)查中,特異性抗體的檢測也具有特殊的、重要的意義。事實(shí)上,其他如呼吸、消化、泌尿、心血管、血液、內(nèi)分泌、神經(jīng)等系統(tǒng)的一些疾病都與自身免疫有關(guān),都可檢測到相應(yīng)的自身抗體,如胰島素依賴型糖尿病與胰島細(xì)胞抗體、橋本氏甲狀腺炎與甲狀腺微粒體抗體、重癥肌無力癥與乙酰膽堿受體抗體等等的關(guān)系已得到公認(rèn);還有,不孕癥和衰老與自身抗體關(guān)系的研究也正在不斷深入;自身受體抗體的研究,亦具有廣泛的應(yīng)用前景。

原理
在免疫應(yīng)答中,細(xì)胞免疫和體液免疫是兩個(gè)密切相關(guān)、互為調(diào)節(jié)的生理過程,對這兩種免疫反應(yīng)都有許多檢測方法,但迄今為止,在臨床檢驗(yàn)工作中,以體液免疫反應(yīng)中的特異性抗體的檢測應(yīng)用最廣泛。
方法
抗體檢測方法:現(xiàn)在抗體檢測的方法眾多,除傳統(tǒng)的沉淀反應(yīng),凝集試驗(yàn),補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)外,標(biāo)記免疫測定(如酶聯(lián)免疫測定、放射免疫測定、熒光免疫測定、發(fā)光免疫測定等)已成為主要的免疫測定技術(shù),免疫印跡法也發(fā)揮了明顯的作用,一些快速測定法(如快速斑點(diǎn)免疫結(jié)合試驗(yàn))也被廣泛使用。
臨床應(yīng)用
首先抗體檢測用于診斷時(shí),要考慮到患者所在地區(qū)該疾病的發(fā)病情況及與該疾病密切相關(guān)的情況,如正常人血清中抗體的水平,這一點(diǎn)在病原微生物感染的疾病中尤為重要。有些感染性疾病 - 例如病毒感染性疾病,往往采用“雙份血清法”,根據(jù)發(fā)病初期及患病后某個(gè)時(shí)期抗體增長的情況進(jìn)行診斷。眾所周知,許多感性疾病初期,機(jī)體產(chǎn)生的是IgM型抗體,此后才產(chǎn)生IgG型抗體,因此在條件許可的情況下,有合格的試劑盒供應(yīng)時(shí),建議盡可能在患病初期進(jìn)行IgM型抗體檢測,有助于早期診斷。
特殊情況
對許多疾病的預(yù)后及機(jī)體免疫狀況的觀察,也并非特異性抗體檢測可以完全替代的。另一類情況,對某些疾病的診斷,檢測抗原的意義并不大,而依靠的是對這些抗原所引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的檢測,而這些抗體是致病因素之一,也是臨床診斷的重要依據(jù)。自身免疫病中自身抗體的檢出就是最好的例子之一。結(jié)締組織病與自身抗體的關(guān)系,可能是研究最多的一類疾病。
由此可見,自身抗體的檢測對于許多疾病的診斷或闡明致病機(jī)理都有重要價(jià)值。隨著研究的深入,還會(huì)有更多疾病與自身免疫的關(guān)系將隨著新的自身抗體的發(fā)現(xiàn)而得以明確。本期刊登的張學(xué)軍等和吳慶軍等的論著文章就反映了這方面工作的一些進(jìn)展??梢栽O(shè)想,自身抗體的檢測將成為大家關(guān)注的課題及臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)中一個(gè)重要的組成部分。除自身免疫病外,在諸如免疫缺陷病、免疫增生性疾病、及某些型別的超敏反應(yīng)疾病的診斷中,需檢測的也是各類免疫球蛋白,而不是抗原。
意義
一般來說,診斷感染性疾病,如能從標(biāo)本中直接檢測到病原體是最理想的,但由于某些病原體生長所需條件高,生長時(shí)間長、檢出的陽性率低,給臨床診斷帶來一定困難。特異性抗體的檢出在一定程度上可彌補(bǔ)以上的不足。近年來逐步發(fā)展起來的用免疫學(xué)方法測定標(biāo)本中的病原抗原,或用分子生物學(xué)技術(shù)測定感染因子,無疑對感染性疾病的早期診斷是一個(gè)巨大的進(jìn)步。盡管如此,也還不能完全代替特異性抗體的檢測,如人類免疫缺陷病毒 - HIV,測定其抗體仍是診斷艾滋病的重要依據(jù)。
注意
為了保證試驗(yàn)的特異性和敏感性,無論是顆粒性抗原、組織提取物、多肽抗原、重組抗原都必須純化,否則容易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)。在應(yīng)用標(biāo)記免疫分析中,可引起本底數(shù)值的增高,極大地影響試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。在檢測自身抗體時(shí),許多抗原是用組織提取物,更應(yīng)注意抗原的純化問題。由于不同組織、器官間可存在相同抗原成分,使得同一自身免疫病,可檢出幾種不同自身抗體,同一自身抗體又可出現(xiàn)在不同自身免疫病中,這就影響了檢驗(yàn)的特異性。
因此提示我們,關(guān)于這方面特異性抗原的提取、純化和合成,還有許多工作要做,是一項(xiàng)任重道遠(yuǎn)的任務(wù)。還必須指出,無論檢測哪一種抗體,所用抗原的片段或成分的不同,都可影響其特異性及敏感性。因此采用一種新抗原時(shí),需要進(jìn)行嚴(yán)格對照,方可確定其應(yīng)用價(jià)值。必須明確,不同的檢測方法,靈敏度、準(zhǔn)確性、重復(fù)性并不完全相同,加上試劑盒質(zhì)量不一,都影響到試驗(yàn)結(jié)果。
在應(yīng)用或建立一個(gè)方法時(shí),檢測系統(tǒng)中所有成分的濃度必須經(jīng)過嚴(yán)格滴定,選擇最恰當(dāng)?shù)臐舛确秶?。例如酶?lián)免疫吸附試驗(yàn) - ELISA,抗原及酶結(jié)合物濃度低,最后吸光度值太小,易出現(xiàn)假陰性,如濃度太高,吸光度值偏大,甚至移到標(biāo)準(zhǔn)曲線的平臺,即處于不敏感的范圍便會(huì)明顯影響結(jié)果的可靠性??贵w有保護(hù)性抗體,非保護(hù)性抗體之分,有些抗體的水平達(dá)到高峰后旋即下降乃至消失,有些抗體可長期存在直至終身。
如乙肝核心抗體 - 抗-HBc,陽性率可高達(dá)70%左右,臨床醫(yī)生常因此產(chǎn)生困惑。其實(shí)這是抗-HBc的總抗體,可能長期存在。如其滴度低,即為既往感染過乙肝,有流行病學(xué)意義,高滴度才有臨床診斷意義。再如自身抗體測定中,少數(shù)正常人也存在有少量自身抗體,它不僅對機(jī)體無害,而且能幫助機(jī)體清除衰老及變質(zhì)的細(xì)胞對機(jī)體有利。
另外,在臨床診斷中,須針對不同發(fā)病機(jī)理檢測相應(yīng)抗體,如I型超敏反應(yīng)應(yīng)檢測IgE,而在Ⅱ型超敏反應(yīng)主要測IgG、IgM型抗體,又如鼻咽癌患者查的是EB病毒殼膜抗原-IgA - IgA/VCA抗體。另外抗體測定和其他檢驗(yàn)一樣,存在著假陽性、假陰性的問題,可能由于方法學(xué)的不完善引起,或者由于機(jī)體反應(yīng)性的不同所致,在解釋結(jié)果時(shí)務(wù)必注意。
