朱玉賢 - 中國(guó)科學(xué)院院士
朱玉賢,男,1955年12月出生,浙江省杭州市富陽(yáng)區(qū)人,植物生理學(xué)家,中科院院士,現(xiàn)任武漢大學(xué)高等研究院院長(zhǎng)。
兼任中國(guó)植物學(xué)會(huì)常務(wù)理事兼任植物分子生物學(xué)專業(yè)委員會(huì)主任,中國(guó)生物工程學(xué)會(huì)理事,北京生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)副理事長(zhǎng),《植物學(xué)報(bào)》、《遺傳學(xué)報(bào)》副主編,《分子植物育種》執(zhí)行主編,植物分子遺傳國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、農(nóng)業(yè)基因組學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室學(xué)術(shù)委員會(huì)委員,科技部863高技術(shù)計(jì)劃生物與現(xiàn)代農(nóng)業(yè)領(lǐng)域?qū)<椅瘑T會(huì)委員,農(nóng)業(yè)部國(guó)家轉(zhuǎn)基因生物安全委員會(huì)委員。2013年當(dāng)選發(fā)展中國(guó)家科學(xué)院院士。
主要從事植物分子生物學(xué)、基因調(diào)控、基因工程疫苗研究。主持多項(xiàng)國(guó)家級(jí)重大科研項(xiàng)目,并著有全國(guó)通用教材《現(xiàn)代分子生物學(xué)》和《分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》,譯有《PCR傳奇》和《細(xì)胞的起源》等。
人物經(jīng)歷
早年經(jīng)歷
1955年12月出生于浙江省富陽(yáng)市。
1973年,畢業(yè)于浙江省富陽(yáng)中學(xué),正值文革,參軍入伍。
1977年參加高考,考入浙江農(nóng)業(yè)大學(xué),1982年7月,畢業(yè)于浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)。
1989年12月在美國(guó)康奈爾大學(xué)植物科學(xué)系獲得博士學(xué)位。并去華盛頓大學(xué)生物系攻讀博士后。
工作經(jīng)歷
1991年6月,回國(guó)后一直在北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院工作,主要從事植物基因克隆和表達(dá)研究。
1994年,任北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院教授。
2011年12月,當(dāng)選中國(guó)科學(xué)院院士。
2013年當(dāng)選發(fā)展中國(guó)家科學(xué)院院士。
2014年4月4日,正式加盟武漢大學(xué),受聘為武漢大學(xué)高等研究院院長(zhǎng)。
陜西師范大學(xué)雙聘院士。
常務(wù)副主編,《中國(guó)科學(xué):生命科學(xué)》(中文版)。
主要成就
主要通過研究陸地棉花纖維發(fā)育早期的功能基因組、轉(zhuǎn)錄組學(xué)及雷蒙德氏棉、亞洲棉功能基因組,探索纖維突起、伸長(zhǎng)的分子機(jī)制及調(diào)控規(guī)律。通過大規(guī)模轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析法,獲得大量纖維突起或伸長(zhǎng)階段特異性表達(dá)基因(重點(diǎn)是棉花轉(zhuǎn)錄因子基因家族成員以及激素受體基因),探索棉花基因功能鑒定的新方法。
用RT-PCR等基因表達(dá)分析方法研究已克隆的基因在棉花發(fā)育過程中的器官、組織及發(fā)育時(shí)期等時(shí)空表達(dá)特性,推測(cè)這些基因在棉纖維發(fā)育過程中的作用。分離鑒定植物激素信號(hào)途徑對(duì)棉纖維發(fā)育起重要調(diào)控作用編碼關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的基因,闡明植物激素對(duì)纖維發(fā)育的關(guān)鍵作用。
以雷蒙德氏棉(Gossypium?raimondii)的基因組為參考序列,我們將NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中存在的297239條陸地棉(Gossypium?hirsutum)表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)進(jìn)行了重新組裝和分析,得到了49125條單基因簇(UniGenes)。這些單基因簇的平均長(zhǎng)度達(dá)到了1019堿基對(duì),顯著超過之前組裝的804和791堿基對(duì)。其中,長(zhǎng)度超過3千堿基對(duì)的單基因簇的數(shù)目從30條左右增加到1223條。我們的結(jié)果說明,雷蒙德氏棉基因組的參考序列對(duì)四倍體棉花轉(zhuǎn)錄組的組裝起到非常大的推動(dòng)作用。
轉(zhuǎn)錄組分析分析顯示,四倍體棉花里來(lái)自A和D亞基因組的基因在轉(zhuǎn)錄模式上有顯著差異。在四倍體轉(zhuǎn)錄組中,29547個(gè)單基因簇可能來(lái)自于D亞基因組的貢獻(xiàn),而另外19578個(gè)單基因簇可能是A亞基因組轉(zhuǎn)錄出來(lái)的。最后,大規(guī)模數(shù)據(jù)分析得到的一些棉纖維發(fā)育關(guān)鍵基因在轉(zhuǎn)錄水平的差異可被RT-PCR實(shí)驗(yàn)證實(shí)。
通過高通量測(cè)序方法獲得了8.5G堿基對(duì)高質(zhì)量、無(wú)污染的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù),將約85%的測(cè)序數(shù)據(jù)貼回參考基因組序列上,共鑒定了超過15萬(wàn)個(gè)剪切結(jié)點(diǎn),在10197個(gè)基因中發(fā)現(xiàn)了16437個(gè)可變剪切事件。結(jié)果顯示,平均每四個(gè)棉花基因,就有一個(gè)存在可變剪切現(xiàn)象,說明可變剪切在棉花基因組中是一種廣泛存在的現(xiàn)象。在這些可變剪切事件當(dāng)中,“內(nèi)含子保留”類型占最多的比例(40%),而“跳過外顯子”類型是最少的。
我們選取11個(gè)不同的真合生物進(jìn)行橫向比較,證實(shí)“內(nèi)含子保留”類型在高等植物中所占的比例是最高的,但是在脊椎動(dòng)物當(dāng)中“跳過外顯子”的比例最高,“內(nèi)含子保留”反而最少。為了解釋這巨大差異的來(lái)源,我們進(jìn)一步對(duì)棉花發(fā)生“內(nèi)含子保留”的基因進(jìn)行分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)盡管轉(zhuǎn)座因子的插入在棉花所有內(nèi)含子中所占比例只有2.9%,但是在保留的內(nèi)含子中比例竟高達(dá)43%,這暗示了轉(zhuǎn)座因子的插入可能與內(nèi)含子的選擇性保留有關(guān)。
大量的數(shù)據(jù)分析顯示,插入到保留內(nèi)含子中的轉(zhuǎn)座因子并不是隨機(jī)分布的,而是富集在3’剪切位點(diǎn)上游0-40個(gè)堿基的區(qū)段上,從而影響了該段序列的RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的柔性并導(dǎo)致分支位點(diǎn)偏離最佳位置,在內(nèi)含子剪切的過程中不能發(fā)揮正常的作用,最終導(dǎo)致內(nèi)含子的保留。我們的結(jié)果暗示,轉(zhuǎn)座因子插入所介導(dǎo)的分支位點(diǎn)的分布改變對(duì)于內(nèi)含子保留類型的可變剪切有重要作用,該發(fā)現(xiàn)有助于解釋植物和動(dòng)物之間存在的內(nèi)含子保留差異。
實(shí)驗(yàn)室前期從Salk種子庫(kù)中得到一個(gè)與乳腺癌同源基因的突變體row1-3,該突變體根部表型劇烈。其根部極其短小不能正常發(fā)育,成熟區(qū)細(xì)胞不能正常分化與伸長(zhǎng),QC及向地性完全丟失,同時(shí)其根尖不含淀粉粒,結(jié)構(gòu)模糊不具有典型的根端分生組織結(jié)構(gòu),表明其也不能進(jìn)行正常的分化。
通過對(duì)其表型分析結(jié)合PCR與GFP定位技術(shù),我們找到了ROW1基因缺失后可能造成以上劇烈表型的原因,即WOX5過量表達(dá)造成的。通過遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)方法,對(duì)該突變體中的WOX5完全敲除或者部分敲除可以回復(fù)或者部分回復(fù)該突變的表型,在row-3/wox5-1雙突變體中,其跟的伸長(zhǎng)和向地性恢復(fù),同時(shí)其根端分生組織可以正常風(fēng)化產(chǎn)生含淀粉粒的小柱細(xì)胞。進(jìn)而證明了ROW1是WOX5的負(fù)調(diào)控因子,通過抑制WOX5的表達(dá)來(lái)限定該基因只在QC細(xì)胞中表達(dá)。
科研成果
1.?克隆得到與豌豆短日不衰老性狀相連鎖并赤霉素誘導(dǎo)表達(dá)的PPF-1基因。
將PPF1基因與報(bào)告基因GFP連接后用基因槍轟擊法導(dǎo)入洋蔥根尖表皮細(xì)胞后發(fā)現(xiàn),綠色熒光標(biāo)記大量集中在細(xì)胞膜上。永久性轉(zhuǎn)化擬南芥后發(fā)現(xiàn),綠色熒光標(biāo)記集中于葉綠體膜上。把該基因連接到35S啟動(dòng)子后面并分別按正向或反向模式導(dǎo)入擬南芥基因組中發(fā)現(xiàn),正向表達(dá)PPF1基因,能明顯延緩轉(zhuǎn)基因擬南芥的開花和生長(zhǎng)發(fā)育進(jìn)程,推遲其衰老。
反向表達(dá)該基因,使擬南芥中原有的同源基因失活,則明顯提早轉(zhuǎn)基因植物的開花期,加速植株衰老。將PPF1基因連接到動(dòng)物基因啟動(dòng)子下游并導(dǎo)入到本身無(wú)內(nèi)鈣電流的癌細(xì)胞系中,證實(shí)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系擁有強(qiáng)大的內(nèi)向鈣電流,表明PPF1基因可能編碼了是植物體內(nèi)的鈣離子通道蛋白。正在對(duì)不衰老細(xì)胞特異性表達(dá)的cDNA進(jìn)行體內(nèi)定位雜交和體外表達(dá)研究,揭示其光周期特性、表達(dá)調(diào)控規(guī)律以及與細(xì)胞衰老的關(guān)系。
2.棉花纖維發(fā)育早期特異性表達(dá)基因的大規(guī)模分離與克隆。
以陸地棉徐州142和無(wú)長(zhǎng)絨無(wú)短絨突變體(fuzless-lintless,?fl)為實(shí)驗(yàn)材料,通過大規(guī)模分離、鑒定和研究棉花纖維伸長(zhǎng)期相關(guān)基因,尋找用于遺傳工程改良棉纖維的靶基因。選用開花后10天(10DPA,?10?days?post?anthesis)、棉花纖維伸長(zhǎng)速度最快的陸地棉纖維與fl突變體胚珠作為起始材料,用PCR-Select?cDNA?Subtraction方法獲得了纖維特異的cDNA減法庫(kù),分離到172個(gè)纖維特異或高表達(dá)的基因,為闡明棉花纖維發(fā)育的分子機(jī)制奠定了良好的基礎(chǔ)。
3.牛結(jié)核桿菌多價(jià)核酸疫苗的研制與應(yīng)用。
克隆了MPT-64、Ag85B、ESAT-6、MPT-63和MPT-83等分泌蛋白的結(jié)構(gòu)基因全序列,制備了大量無(wú)內(nèi)毒素的重組表達(dá)載體pJW4303DNA,篩選出了兩組結(jié)核桿菌DNA三價(jià)苗組合,對(duì)模型動(dòng)物鼠的保護(hù)效率達(dá)到100%,最好的組合減菌量達(dá)到BCG陽(yáng)性對(duì)照組的80-100倍,是陰性對(duì)照組的3萬(wàn)倍左右。首次用選出的兩組三價(jià)聯(lián)苗進(jìn)行了本動(dòng)物牛的免疫和攻毒實(shí)驗(yàn),剖解結(jié)果表明牛結(jié)核桿菌多價(jià)DNA疫苗對(duì)本動(dòng)物牛的保護(hù)率達(dá)到75-80%,而陰性對(duì)照組保護(hù)效率為0,BCG陽(yáng)性對(duì)照組的保護(hù)率為20%。
何梁何利科學(xué)與技術(shù)進(jìn)步獎(jiǎng),2012
國(guó)家自然科學(xué)二等獎(jiǎng),2011
國(guó)家級(jí)教學(xué)成果獎(jiǎng)二等獎(jiǎng),2009
教育部自然科學(xué)一等獎(jiǎng),2008
教育部科技進(jìn)步二等獎(jiǎng),2000
中國(guó)國(guó)家圖書提名獎(jiǎng)、中國(guó)國(guó)家科技圖書獎(jiǎng),1999
論文著作
主編《現(xiàn)代分子生物學(xué)》,出版發(fā)行超過30萬(wàn)冊(cè),已成為我國(guó)高等學(xué)校生物學(xué)專業(yè)本科生分子生物學(xué)主要教材。由于在乙烯信號(hào)通路上下游長(zhǎng)期而系統(tǒng)性的研究,世界植物科學(xué)著名的綜述期刊“當(dāng)代植物學(xué)觀點(diǎn)”邀請(qǐng)他撰寫論文,闡述他們對(duì)棉纖維這個(gè)特殊細(xì)胞的認(rèn)知。該研究于2011年獲國(guó)家自然科學(xué)二等獎(jiǎng)。
已發(fā)表經(jīng)同行評(píng)審的科研論文98篇,其中被SCI收錄85篇(通訊作者或第一作者的SCI論文66篇),包括3篇植物科學(xué)國(guó)際最前沿刊物“植物細(xì)胞”,1篇美國(guó)科學(xué)院院報(bào),1篇“分子與細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)”,2篇“當(dāng)代植物學(xué)觀點(diǎn)”應(yīng)邀綜述論文,總影響因子超過300,篇均影響因子相當(dāng)于世界植物科學(xué)排名10%的刊物。
主要文獻(xiàn)
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出版圖書
現(xiàn)代分子生物學(xué)
作者名稱:朱玉賢
《現(xiàn)代分子生物學(xué)》是1997年由高等教育出版社出版的圖書,作者:朱玉賢,李毅,鄭曉峰。本書通過多個(gè)方面對(duì)現(xiàn)代分子生物學(xué)基本問題做了全面系統(tǒng)的分析。
