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金蟲草 - 一種藥草

北蟲草是北冬蟲草的簡稱,其主要的化學(xué)成分藥理,藥效與野生冬蟲夏草極為相似,經(jīng)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究分析室,中國科學(xué)院沈陽分院理化測試中心等權(quán)威部門的檢測表明,北蟲草的一些主要營養(yǎng)及藥物成份如蟲草素、蟲草多糖、蛋白質(zhì)等還要高于冬蟲夏草。

基本資料

簡介

其主要的化學(xué)成分藥理,藥效與野生冬蟲夏草極為相似,經(jīng)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究分析室,中國科學(xué)院沈陽分院理化測試中心等權(quán)威部門的檢測表明,北蟲草的一些主要營養(yǎng)及藥物成份如蟲草素、蟲草多糖、蛋白質(zhì)等還要高于冬蟲夏草。據(jù)《全國中草藥匯編》記載:”北蟲草的子實體及蟲體可作為冬蟲夏草入藥”.

因此,北蟲草在藥理功能及臨床效果方面與野生冬蟲夏草基本是一致的.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,北蟲草不僅含有豐富的蛋白質(zhì)(含量為39.37%,是豬肉,牛肉,羊肉蛋白質(zhì)含量的1.8,1.5,1.9倍)和氨基酸,而且含有30多種人體所需的微量元素.其中P(磷)的含量是冬蟲夏草的3.5倍,Zn(鋅),Cu(銅),Fe(鐵三種元素的含量是28種補益藥平均值的1.8,2.1和8.8倍,Se(硒)的含量與黃芪的含量相當(dāng).

冬蟲夏草首次記載使用是清代吳儀洛《本草叢新》,書中認(rèn)為冬蟲夏草性味甘,溫。功能補肺益腎,化痰止咳??捎弥诰每忍摯a(chǎn)后虛弱、陽痿陰冷等“虛”的病癥。據(jù)研究:冬蟲夏草主要含有冬蟲夏草素、蟲草酸、腺苷和多糖等成分;冬蟲夏草素能抑制鏈球菌、鼻疽桿菌炭疽桿菌等病菌的生長,又是抗癌的活性物質(zhì),對人體的內(nèi)分泌系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)有好的調(diào)節(jié)作用;蟲草酸能改變?nèi)梭w微循環(huán),具有明顯的降血脂和鎮(zhèn)咳祛痰作用;蟲草多糖是免疫調(diào)節(jié)劑,可增強機體對病毒及寄生蟲的抵抗力。

蟲草多糖和蟲草的作用

素具有降血糖、抗腫瘤、降血脂,增強免疫力,增強性功能、補腎壯陽、益精氣、防止衰老、延年益壽的功效。能提高肝臟的解毒能力,起到護(hù)肝的作用。蟲草含有人體必需的19種氨基酸和豐富的蛋白質(zhì)以及大量的維生素類物質(zhì),含有人體必須的微量元素17種以上,其中人體必須的被稱為抗癌之王的“硒”含量極其豐富。而且含有大量的超氧化物歧化酶(SOD)它是保護(hù)人身體細(xì)胞的超級物質(zhì),幫助體內(nèi)消除細(xì)胞腺粒體過多產(chǎn)生的自由基,避免細(xì)胞受到氧化、老化或破壞。可使機體紅血球內(nèi)的SOD活性增強,活化細(xì)胞,抗衰老、抗氧化。

新疆奇豆:人體血糖代謝的調(diào)節(jié)取決于3個因素進(jìn)行作用協(xié)調(diào),這3個因素分別是胰島素、葡萄糖耐量受體和胰島受體。人體含鉻元素減少,就會導(dǎo)致胰島素活性降低,受體數(shù)量減少,糖耐量受損,從而引發(fā)糖尿病。鷹嘴豆中“鉻”元素,“鉻”是葡萄糖耐量因子(GTF)的組成部分,鷹嘴豆中的“鉻”可以使體內(nèi)胰島素活性和胰島素受體數(shù)量增加,達(dá)到控制血糖、激活β-胰臟胰島素因子生成,改善糖尿病癥狀的目的。另鷹嘴豆異黃酮對女性健康十分有益,具有活性的植物性類雌激素,它能夠滋陰潤燥延遲女性細(xì)胞衰老、養(yǎng)顏、豐乳效果顯著.

具有治療作用

金蟲草的作用很廣發(fā),可以緩解肺部疾病,對于出現(xiàn)的咳嗽、氣喘、肺氣虛、肺氣腫、矽肺、塵肺、煙肺、自汗盜汗、腰膝酸軟、頭昏頭暈、腎虛腎虧、身寒肢冷、容易感冒等癥有一定的改善作用和效果。金蟲草可以有治療四肢發(fā)冷的作用,對于出現(xiàn)的盜汗啊還有體質(zhì)虛弱等等的癥狀有調(diào)理的作用和效果。

種植方法

一、冬蟲夏草和寄主昆蟲

藥用冬蟲夏草,最早的文字見于清朝汪昂的《本草備要》 - 1694所載:"冬蟲夏草,甘平,保肺益腎,止血化痰,止勞咳。四川嘉定府所產(chǎn)者佳。冬在土中,形如老蠶,有毛能動,至夏則毛出土上,連身俱化為草。若不取,至冬復(fù)化為蟲。后來,趙學(xué)敏的《本草綱目拾遺》 - 1756一書中記載:"夏草冬蟲,功與人參同,能治諸虛百損",該書還對冬蟲夏草的產(chǎn)地、食用方法和用量有詳細(xì)的記述。1757年吳儀洛所著的《本草從新》一書也指出:“冬蟲夏草保肺益腎、止血化痰?!逼浜蟆肚摇?、《文房肆考》、《四川通志》、《本草圖說》等數(shù)百部古藥書中都記載了冬蟲夏草。

我國把冬蟲夏草作為藥材出口到國外的歷史比文字記載的更悠久。從明代中葉1400一1465年間就從浙江傳到日本,并在貴族中廣泛食用。1723年由歐洲的傳教士尚加特利茨庫把從中國西北采到的冬蟲夏草帶到法國,由Reaumur在法國科學(xué)院的學(xué)士大會作了介紹,并登在會議紀(jì)要上;1943年,Berkeley鑒定了中國的冬蟲夏草,正式定名為:中國蟲草Sphaeri sienesis;1878年由Saccardo歸為蟲草屬Cordyceps,冬蟲夏草的研究在國外引起重視,中國蟲草也開始馳名于世。

冬蟲夏草由于僅分布于中國,又是數(shù)百年來我國和亞洲人民視為與天然人參、鹿茸相媲美的名貴滋補中藥材,享有極高的聲譽。它藥性作用溫和,比其他種類的滋補品更具有廣泛的藥用和食用性,長期以來是我國既可藥用又可食用的高級滋補品,并且一年四季都可食用,對老、少、病、弱、虛者皆宜服用,無任何副作用。古代70多部中藥學(xué)文獻(xiàn)把冬蟲夏草的功用歸納為:"能陰陽并補,治勞嗽膈癥,諸虛百損;功與人參、鹿茸同,但藥性溫和,老少病虛者皆宜食用……。"新中國建立以來,我國有200多部藥書詳細(xì)記載了冬蟲夏草的藥效與用途,歷部《中華人民共和國藥典》記載其功用為:"補肺益腎,止血化痰。用于久咳虛喘,勞嗽咯血,陽痿遺精,腰膝酸痛。"隨著國內(nèi)外醫(yī)學(xué)的發(fā)展和中藥學(xué)在全世界逐步普及,近年來發(fā)現(xiàn)冬蟲夏草的功用效果越來越廣泛。經(jīng)研究證明,它是具有鎮(zhèn)靜,止血,抗驚厥,降壓,改善心肌缺血,抗血小板凝結(jié),抗衰老,調(diào)節(jié)人體免疫和具有抗肺癌、淋巴癌和肝癌功能的藥物。目前越來越引起國內(nèi)外藥學(xué)界和生物學(xué)界研究者的重視,有關(guān)研究報道大量增加。

最早科學(xué)地描述和發(fā)表我國青藏高原有蝠蛾屬昆蟲分布是英國的Poujade1886年在四川省的寶興縣雪山上發(fā)現(xiàn)一種蝠蛾,被他定名為德氏蝠蛾Hepialus davidi;后來Alphe raky、Staudinger等學(xué)者分別于1889和1895年在西藏發(fā)現(xiàn)了暗色蝠蛾H.nebulosus(同種異名:泥色蝠蛾H.luteus、異色蝠蛾H.varians兩個種類。1909年Oberthur在法國的Armorica半島上整理由中國西藏、四川帶去的藥材和植物標(biāo)本中,發(fā)現(xiàn)一頭蝠蛾成蟲,并以該半島名稱定名為H.armoricanus,但在發(fā)表新種時說明,該種蝠蛾產(chǎn)地可能是中國川藏高原,因在半島一直未再發(fā)現(xiàn)有該種蝠蛾分布;后來一直到1959年中國科學(xué)院動物研究所科研人員在四川康定等地采到大量的蝠蛾成蟲和幼蟲,經(jīng)朱弘復(fù)鑒定,與在法國Armorica半島發(fā)現(xiàn)的蝠蛾是同一種,從而定名為蟲草蝙蝠蛾,并確定為中國特產(chǎn)的冬蟲夏草菌的寄主昆蟲之一。到目前為止,在青藏高原及邊緣地區(qū)已發(fā)現(xiàn)中國特有的冬蟲夏草菌寄主昆蟲37種。

二、冬蟲夏草與蝠蛾昆蟲人工培育

- 一冬蟲夏草茵的寄主昆蟲飼養(yǎng)繁殖技術(shù)要進(jìn)行冬蟲夏草的人工培育,首先必須大量人工飼養(yǎng)寄主一一蝠蛾屬昆蟲。蝠蛾一生中有98%的時間都在土壤內(nèi)生活,僅有2.5一13d的成蟲期營地面生活。所以,這類昆蟲的人工飼養(yǎng)管理主要是在土壤中開展。

1.蝠蛾的飼養(yǎng)工具

- 1蝠蛾卵的飼養(yǎng)工具。飼養(yǎng)蝠蛾卵可用兩種方法

一是用直徑15一20cm的玻璃培養(yǎng)皿,墊上2一3層濾紙,皿內(nèi)放一塊吸水棉保持濕度,每皿可飼養(yǎng)200一500粒卵。此法利于觀察,但難掌握濕度。

二是用廣口瓶或者的玻璃飼養(yǎng)缸,內(nèi)置3一5cm厚的過篩細(xì)腐殖土,種上1一2棵珠芽寥植物,把卵放養(yǎng)于土表至lcm深的土層中,每瓶可飼養(yǎng)300一1000粒卵;飼養(yǎng)時只要掌握住植物不枯萎,即可不加濕度。此法卵的孵化率高,但觀察和移植幼蟲對比較困難。

- 2幼蟲的飼養(yǎng)工具有以下4種。

a.玻璃養(yǎng)蟲缸:用18一25cmX30一35cm的玻璃缸,也可用標(biāo)本浸泡缸,放置土壤15一25cm,種上幼蟲取食的植物,把剛孵化幼蟲移入缸內(nèi),每缸可飼養(yǎng)10一30頭幼蟲。

b.地下養(yǎng)蟲箱:箱一般高30一50cm,寬20一25cm,厚3一5cm。飼養(yǎng)箱骨架用鋼筋焊成,上面鋼筋做成提手,便于提動;寬的兩面用3一5mm玻璃,便于觀察蟲體活動;底和兩個側(cè)面裝上16孔目的銅紗網(wǎng),便于水分滲入。然后裝上土壤,種植飼料植物,每箱放養(yǎng)20一50頭幼蟲;在較堅實的地上挖一個比飼養(yǎng)箱體積稍大和深的槽,把養(yǎng)蟲箱放入槽中,觀察時將養(yǎng)蟲箱提出地面,抹去外表玻璃上的土壤,即可清楚看到幼蟲活動情況。

c.大型養(yǎng)蟲籠:在半自然的狀況下,選擇一塊排水好、土質(zhì)疏松的場地,挖長12一l5m、寬2一3m、深4Ocm的深槽,底部和四周墊上尼龍紗網(wǎng) - 最好用雙層,小蟲不易鉆出,再把疏松的腐殖土鏟進(jìn)填平,種上幼蟲食物,放入幼蟲飼養(yǎng),每平方米可放養(yǎng)30一50頭;該法有利于大規(guī)模飼養(yǎng),但觀察困難。

d.用各類盆具裸露飼養(yǎng):把植物飼料洗凈放入盆中,放入幼蟲飼養(yǎng),盆口覆蓋一層黑布或者黑紙遮光。此法利于生活史觀察,但要注意勤換飼料和清除糞便。

- 3蛹和成蟲的飼養(yǎng)工具。制作長50cm、寬50cm、高55一60cm的養(yǎng)蟲箱。底部用薄鐵板或雙層銅紗網(wǎng)封底;頂和四周用鐵紗或尼龍紗封蓋,前面可制成一道活動紗網(wǎng)門。在箱底放入10一20cm的土壤,種上植物,把蛹和成蟲放養(yǎng)土中,此法可進(jìn)行密植飼養(yǎng)。

2.飼養(yǎng)技術(shù)要點

- 1土壤的選擇。土壤是蝠蛾昆蟲一生中最主要的活動場所。土壤條件是否適合該蟲生活是人工飼養(yǎng)成活率高低的關(guān)鍵之一。最適宜蝠蛾生長的是高山草甸土;次之是流石灘和草甸混合土;再次之是高山棕色、暗棕色林土,其他土壤對此蟲生長不良。

- 2食料的選擇。幼蟲最喜取食圓穗蓼、珠芽蓼、黃芪、小大黃等植物的嫩根芽。由于蝠蛾昆蟲是一類雜食性昆蟲,在無上述植物的地方,可用禾本科 - 如青稞、麥、谷芽等;十字花科、莎草科的嫩根飼養(yǎng)。在中、低海拔地區(qū) - 適宜生活的溫度下用土大黃、胡蘿卜、白蘿卜、白薯 - 紅苕、馬鈴薯、蘋果等飼喂也能正常生長發(fā)育,最好為土大黃、胡蘿卜和白薯三類。

- 3溫、濕度的選擇。蝠蛾昆蟲是一類耐低溫而怕高溫的昆蟲。最適宜在15一19C中生活成長;此蟲最適宜空氣濕度75%一85%,土壤含水量40%一45%之間。

3.管理技術(shù)

- 1成蟲期。成蟲不取食任何食物,只要保持水分和適宜溫度即能正常成活和產(chǎn)卵。但蛾子棲息環(huán)境與產(chǎn)卵量有關(guān)。成蟲最喜選擇有杜鵑和蝠蛾幼蟲取食的蓼科等植物根旁產(chǎn)卵,所以在蛾子交配產(chǎn)卵前植上幾株相關(guān)植物最佳;另外不能有強光影響。

- 2卵期。要使卵能正常孵化,一定要掌握好適宜的溫、濕度。

- 3幼蟲期。幼蟲由于生長期長,而且蟲體壁薄而易破,飼養(yǎng)時一定要細(xì)心,除了必要的觀察、換土和換食料外,盡量減少翻動。幼蟲的飼養(yǎng)關(guān)鍵是初孵的幼齡時期,初孵幼齡蟲要給足細(xì)小鮮嫩、濕度不高的食物;土壤最好經(jīng)過篩檢,以免粗硬物擦傷主體。此外,為了延長食料和土壤不霉壞,更換前用紫外燈照射殺菌l5min,土壤也可在陽光下暴曬1一2h后再用。

- 4蛹期。養(yǎng)蛹時,把養(yǎng)蛹器皿內(nèi)的土壤壓實,然后用與蛹粗細(xì)的木棍人工造一土室,土室略斜,深約2一3cm,每室放一蛹,放蛹時,蛹頭向土表面,上用細(xì)土蓋住。蛹的溫濕度,可控制在大氣濕度80%一85%,土壤含水量42一45%之間,溫度18一22℃之間。

[二]冬蟲夏草菌的人工培養(yǎng)技術(shù)

要獲得純正的冬早夏草菌種必須進(jìn)行人工的分離、純化、復(fù)壯、保存等工作。

1.分離冬蟲夏草菌的技術(shù)與條件

- 1材料要求。獲得純的菌種對材料要求比較嚴(yán)格;一般來說如果是進(jìn)行冬蟲夏草的組織塊分離法,最佳的分離材料是每年的10月底至11月份,青藏高原高寒草甸土壤剛開始凍結(jié)時期采的材料,這個時期冬蟲夏草菌剛感染蝠蛾幼蟲進(jìn)入僵蟲期不長時間,嫩小的子座芽剛長出蟲頭部0.2一0.5cm,蟲體內(nèi)其他雜菌較少,最易進(jìn)行分離。如果是第二年5一6月份采的材料,僵蟲體和子座上都有許多種雜菌共生或腐生,難獲得純菌種。若用子囊孢子進(jìn)行分離培養(yǎng),材料最好在每年的7月中、下旬子囊孢子剛有部分成熟期采集分離培養(yǎng)。

- 2操作方法。有以下3步。

a.僵蟲體 - 即菌核的分離:分離前,用水刷洗干凈主體表面,再用無菌水清洗2一3次;用0.1%一0.2%的升汞溶液,對分離材料進(jìn)行約3一5min的表面消毒;再用無菌水清洗。選取與胸足為界的前段部分。用解剖刀切去表皮,避開消化道,取血腔菌絲切成芝麻粒大小,壓入平板培養(yǎng)基中,每皿1一2粒。置于15一19℃中培養(yǎng),待菌落長出0.2一0.5cm時,挑選少量菌絲反復(fù)在平板培養(yǎng)基上分純2一4次,確定無其他雜菌后,移入試管保存和培養(yǎng)。

b.子座芽分離:從僵蟲頭頂切下洗凈的子座芽,置入0.1%升汞液中消毒2一3min,用無菌水洗凈,切取中間部位組織塊壓入培養(yǎng)基中;培養(yǎng)條件同a。

c.子囊孢子分離:用透明紙袋套住子囊孢子成熟的子座,讓子囊孢子彈跳粘貼在紙袋上,然后,把有子囊孢子的紙袋浸入25%的葡萄糖液中,洗下孢子,放入15一19℃中培養(yǎng),每天鏡檢,當(dāng)袍子萌發(fā)時,用微吸管吸單個孢子滴于平板中培養(yǎng);培養(yǎng)條件同a。也可把整個成熟的冬蟲夏草帶回室內(nèi),用棉紙把僵蟲和連蟲體的子座包住,僅留出有孕部分,在無菌室中,橫放,下置一片載玻片,隨時保持主體濕度;每天鏡檢,當(dāng)看到子囊孢子彈到玻片時,用微吸管吸到平皿的培養(yǎng)基中培養(yǎng);培養(yǎng)條件同a。

- 3培養(yǎng)基的選用。

a.馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 - PDA,此種配方是所有蟲草菌屬真菌的通用培養(yǎng)基,在分離培養(yǎng)初期可用該配方,不過菌種生長不十分旺盛,而且易老化、退化。

b.加富培養(yǎng)基 - 1:多性蛋白臍10g,葡萄糖50g,磷酸氫二鉀1g,硫酸鎂0.5g,活蠶蛹30g,生長素0.5μg,瓊脂20g,加水1000mL,pH:5.0。

加富培養(yǎng)基 - Ⅱ:蛋白脯40g,葡萄糖40g,去皮鮮馬鈴薯100g,磷酸氫二鉀1g,硫酸鎂0.5g,牛肉膏10g,生長素0.5μg,蝠蛾活幼蟲 - 磨碎30g,瓊脂20g,高寒草甸土浸出液10OOmL,pH:5.0。

在加富培養(yǎng)基上,菌落比在PDA培養(yǎng)基上生長旺盛和迅速;加富Ⅱ號又優(yōu)于Ⅰ號。

2.生長特性冬蟲夏草菌的分離培養(yǎng)中須掌握溫度、pH值、光照、碳和氮源及無機鹽的利用狀況。

- 1不同溫度對菌絲生長的影響。冬蟲夏草菌喜偏低溫度。在0一4℃時能緩慢生長;5一8℃時生長速度加快;10一19℃是此菌較適生長發(fā)育的范圍;最佳生長溫度為15一l9℃。超過20℃菌絲猛長,菌落由白色變?yōu)榛液诨蜃攸S色,開始出現(xiàn)變異,所以不宜高溫培養(yǎng)。

- 2對pH值的要求。冬蟲夏草菌是一種偏酸性真菌,最適pH值為5.0一6.0,當(dāng)pH值為4.5以下和6以上時,隨著增高或降低,生長緩慢至不生長。

- 3光照的影響。此菌的子囊孢子萌發(fā)和菌絲生長初期,適應(yīng)于弱光和短光照,后期則適應(yīng)于較強光照。在人工培養(yǎng)中,菌絲、分生孢子和子座等具有明顯的趨光性,向陽面生長多而密,背光面生長稀疏,全黑環(huán)境下培養(yǎng)的各種菌態(tài)纖弱、細(xì)長、稀疏。

- 4對碳源的利用。冬蟲夏草菌可利用多種碳源,但以葡萄糖和麥芽糖合用時生長最快,單用葡萄糖時也能良好地生長,次之是馬鈴薯等淀粉,再次之是蔗糖。

冬蟲夏草菌是一種由寄生活體寄主,再由腐生階段發(fā)育成熟的真菌,所以對氮源中的多種有機氮均能較好的利用。而以活蟲體最佳;蛋白胨與酵母膏合用生長也十分理想,次之是二者單獨使用,再次之是牛肉膏等。而對無機氮如硫酸銨、硝酸鉀等利用較差。

對灰分養(yǎng)料有一定的需求,在有微量的硫酸鎂、磷酸氫二鉀的培養(yǎng)基中生長旺盛,次之是磷酸二氫鉀,其他鈉、鈣、鐵、銅等無機鹽也可利用。

3.培養(yǎng)方式冬蟲夏草菌分離純化后,即可作為各種實驗和擴大生產(chǎn)應(yīng)用。

- 1其擴大生產(chǎn)的方法常有三種:固體靜置培養(yǎng)法、振蕩培養(yǎng)法和大罐通氣發(fā)酵培養(yǎng)法。

a.靜置培養(yǎng):主要用在固體培養(yǎng),如試管斜面、三角瓶培養(yǎng)、米飯培養(yǎng)等等。在靜置培養(yǎng)中只要掌握好溫度和光照即可使菌正常生長。當(dāng)斜面上的分生孢子成熟后,即可存入1一2℃的冰箱中保存8一14個月,也可作為種子直接用于生產(chǎn)。

b.振蕩培養(yǎng):采用液體培養(yǎng)菌種或小規(guī)模繁殖培養(yǎng),都可用振蕩培養(yǎng)。振蕩培養(yǎng)的培養(yǎng)基,把固體培養(yǎng)基減去瓊脂即可。設(shè)備最好選用恒溫振蕩培養(yǎng)機,用三角瓶置液體培養(yǎng)基,把試管固體菌種接入即可培養(yǎng)。經(jīng)不斷振蕩使液體培養(yǎng)基中各種成分混合均勻而不致沉淀,同時促進(jìn)氣體與液體接觸和交換,使氧進(jìn)入液體培養(yǎng)基中,利于菌絲生長和分生孢子形成。

c.大罐通氣發(fā)酵培養(yǎng):在大規(guī)模生產(chǎn)菌絲和分生孢子等菌粉時,必須用大罐通氣發(fā)酵培養(yǎng)法。該方法通氣是采用吸氣或真空泵減壓等方法,經(jīng)過濾器除雜菌,送入罐內(nèi)液體培養(yǎng)基中供冬蟲夏草菌的生長發(fā)育。

- 2發(fā)酵工藝流程。

自然冬蟲夏草分離純化、試管斜面種、振蕩器液體一級種、二級種、小型種子發(fā)酵種子罐、生產(chǎn)發(fā)酵罐、濃縮、噴粉干燥、成品菌粉。

冬蟲夏草菌罐中發(fā)酵要求溫度在20一25℃,罐壓392.3一686.5kPa - 0.4一0.7kg/cmz,通氣量為0.5一1.OVVm*;注入發(fā)酵罐中的液體培養(yǎng)基為罐容的65%一75%為宜。接種量為10%,攪拌速度為180r/min,培養(yǎng)時間72一96h,即可放罐濃縮和噴粉。

- 3發(fā)酵培養(yǎng)基多用。鮮馬鈴薯 - 去皮8%,蔗糖2%,玉米淀粉0.5%,蠶蛹粉1%,蛋白胨0.4%,硫酸銨0.2%,pH值5.5一6.0。

- 4發(fā)酵培養(yǎng)成品標(biāo)準(zhǔn)。分生孢子即幾全脫落母體孢子梗,孢子梗數(shù)量增加不明顯時,在鏡下計數(shù)檢查,每毫升含分生孢子18億一25億個;殘?zhí)堑陀?%;氨基氮低于0.2mg/mL,即可成為成品菌液。

4.冬蟲夏草菌回接要點把有性型或無性型的冬蟲夏草菌孢子回接到寄主昆蟲體上,是人工培養(yǎng)有性型冬蟲夏草和復(fù)壯無性型菌種的關(guān)鍵措施。

- 1回接時期。冬蟲夏草回接關(guān)鍵在于選擇寄主昆蟲抗菌薄弱時期,一是蛻皮期;二是幼蟲取食活動激烈,摩擦損傷率較高時期。

- 2回接方法。又分兩種。

a.噴霧法:當(dāng)飼養(yǎng)的蝠蛾幼蟲達(dá)4一6齡蟲,有1/3以上的幼蟲蛻皮時,把幼蟲集中,用子囊孢子或者分生孢子對入5%一10%葡萄糖液噴霧到蟲體或食物上,接種后約30min,菌液在蟲體上略干,把幼蟲放回土壤中任其自然生活。此法感病率高,但缺點是,幼蟲不易從土中取出集中,而且集中時幼蟲有互相殘殺的習(xí)性,蟲體被咬傷后,易被雜菌感染致死,冬蟲夏草菌絲未充滿體腔時,傷蟲就會腐爛,不能形成僵蟲 - 菌核。

b.自然接觸法:在大面積半自然土壤中飼養(yǎng)蝠蛾幼蟲,定時取小樣觀察幼蟲生長狀況,當(dāng)大部分幼蟲適宜感病時,用飼料植物浸菌液種植和用細(xì)土拌菌接種,均勻撒入養(yǎng)蟲的地表上,然后噴水,使菌滲入土中,幼蟲取食活動時接觸感染。此法寄主感染率不太高,但一經(jīng)感染致病,冬蟲夏草菌長勢好,而且未感病的蝠蛾幼蟲能正常生長,繁殖后代。

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